Osteoarthritis (OA) ass eng vun de laangfristege chronesche degenerativen Gelenkerkrankungen, déi d'eeler Bevëlkerung iwwer 65 Joer betrëfft.
1]. Am Allgemengen gi bei Arthrose-Patienten eng beschiedegt Knorpel, entzündegt Synovium an erodéiert Chondrozyten diagnostizéiert, déi Péng a kierperlech Belaaschtung ausléisen [
2Arthritesch Péng gëtt haaptsächlech duerch d'Degeneratioun vum Knorpel an de Gelenker duerch Entzündungen verursaacht, a wann de Knorpel eescht beschiedegt ass, kënne Schanken matenee kollidéieren, wat onerdréilech Péng a kierperlech Belaaschtung verursaacht [
3D'Bedeelegung vun entzündleche Mediatoren mat Symptomer wéi Péng, Schwellungen a Steifheet vum Gelenk ass gutt dokumentéiert. Bei Arthrose-Patienten ginn entzündlech Zytokine, déi d'Erosioun vum Knorpel a subchondralem Knach verursaachen, an der Synovialflëssegkeet fonnt [
4]. Zwee Haaptbeschwerden, déi OA-Patienten am Allgemengen hunn, si Péng an Synovialentzündung. Dofir sinn déi primär Ziler vun den aktuellen OA-Therapien d'Reduzéierung vu Péng an Entzündung. [
5Obwuel déi verfügbar Behandlungen fir Arthrose, dorënner net-steroidal a steroidal Medikamenter, eng bewisen Effizienz bei der Linderung vu Péng an Entzündungen hunn, huet déi laangfristeg Notzung vun dëse Medikamenter schwéier Konsequenze fir d'Gesondheet, wéi kardiovaskulär, gastrointestinal a renal Dysfunktiounen [
6Dofir muss e méi effektivt Medikament mat manner Niewewierkunge fir d'Behandlung vun Arthrose entwéckelt ginn.
Naturprodukter fir d'Gesondheet gi ëmmer méi populär, well se sécher a liicht verfügbar sinn [
7Traditionell koreanesch Medikamenter hunn hir Effizienz géint verschidde entzündlech Krankheeten, dorënner Arthritis, bewisen [
8]. Aucklandia lappa DC. ass bekannt fir seng medizinesch Eegeschaften, wéi d'Verbesserung vun der Zirkulatioun vu Qi fir Péng ze linderen an de Mo ze berouegen, a gouf traditionell als natierlecht Schmerzmittel benotzt [
9Fréier Berichter suggeréieren, datt A. lappa entzündungshemmend Wierkung huet [
10,
11], Schmerzmittel [
12], Antikriibs [
13], a gastroprotektiv [
14] Effekter. Déi verschidde biologesch Aktivitéite vun A. lappa ginn duerch seng wichtegst aktiv Verbindungen verursaacht: Costunolid, Dehydrocostus Lakton, Dihydrocostunolid, Costuslacton, α-Costol, Saussurea Lakton a Costuslacton [
15Fréier Studien behaapten, datt Costunolid anti-inflammatoresch Eegeschaften a Lipopolysaccharid (LPS) gewisen huet, déi d'Makrophagen duerch d'Reguléierung vun NF-kB an dem Hëtzeschockproteinwee induzéiert hunn [
16,
17]. Wéi och ëmmer, keng Studie huet déi potenziell Aktivitéite vun A. lappa fir d'Behandlung vun Arthrose ënnersicht. Déi aktuell Fuerschung huet déi therapeutesch Effekter vun A. lappa géint Arthrose mat Hëllef vu (Mononatriumiodoacetat) MIA an Essigsäure-induzéierte Nagetiermodeller ënnersicht.
Mononatriumiodoacetat (MIA) ass bekanntlech fir d'Entwécklung vu ville Schmerzverhalen an de pathophysiologesche Charakteristike vun der Arthrose bei Déieren [
18,
19,
20Wann et an d'Knéigelenker injizéiert gëtt, stéiert MIA de Chondrozyten-Metabolismus a verursaacht Entzündungen an entzündlech Symptomer, wéi Knorpel- a subchondraler Knacherosioun, déi Haaptsymptomer vun Arthrose [
18]. Eng mat Essigsäure induzéiert Writhing-Reaktioun gëtt allgemeng als Simulatioun vu periphere Schmerz bei Déieren ugesinn, wou den entzündleche Schmerz quantitativ gemooss ka ginn [
19]. D'Mausmakrophagenzelllinn, RAW264.7, gëtt populär benotzt fir d'zellulär Reaktiounen op Entzündungen ze studéieren. No der Aktivéierung mat LPS aktivéieren RAW264 Makrophagen entzündlech Weeër a sekretéieren verschidden entzündlech Intermédiairen, wéi TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS an IL-6 [
20Dës Studie huet déi antinocizeptiv an anti-inflammatoresch Effekter vun A. lappa géint OA an MIA Déiermodeller, Essigsäure-induzéierten Déiermodeller an LPS-aktivéierte RAW264.7 Zellen evaluéiert.
2. Materialien a Methoden
2.1. Planzematerial
Déi gedréchent Wuerzel vun der A. lappa DC, déi am Experiment benotzt gouf, gouf vun der Epulip Pharmaceutical Co., Ltd. (Seoul, Korea) kaaft. Si gouf vum Prof. Donghun Lee, Departement fir Kräuterpharmakologie, Kol. fir Koreanesch Medizin, Gachon Universitéit, identifizéiert, an d'Nummer vum Probebeweis gouf als 18060301 deposéiert.
2.2. HPLC-Analyse vum A. lappa-Extrakt
A. lappa gouf mat engem Refluxapparat (destilléiert Waasser, 3 Stonnen bei 100 °C) extrahéiert. Déi extrahéiert Léisung gouf gefiltert a mat engem Nidderdrockverdampfer kondenséiert. Den A. lappa-Extrakt hat eng Ausbezuelung vu 44,69% no Gefrierdréchnung ënner −80 °C. D'chromatographesch Analyse vun A. lappa gouf mat enger HPLC duerchgefouert, déi mat engem 1260 InfinityⅡ HPLC-System (Agilent, Pal Alto, CA, USA) verbonnen ass. Fir d'chromatesch Trennung gouf d'EclipseXDB C18 Kolonn (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) bei 35 °C benotzt. Insgesamt 100 mg vun der Prouf goufen an 10 ml 50% Methanol verdënnt a fir 10 Minutten sonikéiert. D'Prouwe goufen mat engem Sprëtzfilter (Waters Corp., Milford, MA, USA) vun 0,45 µm gefiltert. D'Zesummesetzung vun der mobiler Phas war 0,1% Phosphorsäure (A) an Acetonitril (B) an d'Kolonn gouf wéi follegt eluéiert: 0–60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% Léisungsmëttel B mat enger Duerchflussrate vun 1,0 mL/min. Den Effluent gouf bei 210 nm mat engem Injektiounsvolumen vun 10 μL observéiert. D'Analyse gouf dräimol duerchgefouert.
2.3. Déierewunnengen a -management
Männlech Sprague-Dawley (SD) Ratten am Alter vu 5 Wochen a männlech ICR Mais am Alter vu 6 Wochen goufe vu Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) kaaft. D'Déiere goufen an engem Raum mat konstanter Temperatur (22 ± 2 °C) an Fiichtegkeet (55 ± 10%) an engem Liicht/Donkel-Zyklus vun 12/12 Stonnen gehalen. D'Déiere goufe méi wéi eng Woch virum Ufank vum Experiment mat de Konditioune vertraut gemaach. D'Déiere kruten eng ad libitum Versuergung mat Fudder a Waasser. Déi aktuell ethesch Reegele fir Déiereversuergung an -handhabung op der Gachon Universitéit (GIACUC-R2019003) goufen an allen Déierexperimentellen Prozedure strikt agehalen. D'Studie war fuerscherblind a parallel entworf. Mir hunn d'Euthanasiemethod no de Richtlinne vum Déiereexperimentellen Ethikkomitee gefollegt.
2.4. MIA-Injektioun a Behandlung
D'Ratte goufen zoufälleg a 4 Gruppen opgedeelt, nämlech Scheingrupp, Kontrollgrupp, Indomethacin an A. lappa. Nodeems se mat enger 2% Isofluoran-O2-Mëschung anästhetiséiert goufen, goufen d'Ratte mat 50 μL MIA (40 mg/m²; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intraartikulär an d'Knéigelenker injizéiert, fir zu experimenteller Arthrose ze féieren. D'Behandlungen goufen wéi follegt duerchgefouert: Kontroll- a Scheingrupp kruten nëmmen d'AIN-93G Basisdiät. Nëmmen d'Indomethacingrupp krut Indomethacin (3 mg/kg), dat an d'AIN-93G Diät integréiert war, an d'A. lappa 300 mg/kg Grupp gouf der AIN-93G Diät ergänzt mat A. lappa (300 mg/kg) zougewisen. D'Behandlungen goufen 24 Deeg nom Dag vun der Arthrose-Induktioun mat enger Rate vun 15–17 g pro 190–210 g Kierpergewiicht pro Dag weidergefouert.
2.5. Gewiichtsdroungsmiessung
No der OA-Induktioun gouf d'Gewiichtsdrokapazitéitsmiessung vun den hënneschte Glieder vun de Ratten wéi geplangt mam Incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) duerchgefouert. D'Gewiichtsverdeelung op den hënneschte Glieder gouf berechent: Gewiichtsdrokapazitéit (%)
